ALPHA淀粉酶檢測(cè)底物（AMYLAZYME）

1.簡介

小麥、大麥谷粒和大麥麥芽中的α-淀粉酶水平是一個(gè)關(guān)鍵的質(zhì)量參數(shù)，在小麥和大麥中該酶水平升高作為發(fā)芽的一個(gè)跡象。在啤酒釀造過程中，需要高水平的α-淀粉酶促使大麥麥芽中的淀粉液化。

已經(jīng)開發(fā)出許多方法測(cè)定麥芽中的α-淀粉酶，但其中多數(shù)方法是基于測(cè)量淀粉中碘與β-極限糊精相互作用產(chǎn)生的顏色變化。由于在麥芽中α-淀粉酶含量高，許多其他方法也能檢測(cè)，如染色標(biāo)記淀粉方法和Ceralpha方法（參見α-淀粉酶檢測(cè)試劑盒說明書K-CERA）。由于氣候原因使收割前發(fā)芽的小麥、大麥生產(chǎn)的面粉，在檢測(cè)時(shí)就存在一個(gè)問題，就是其中能被檢測(cè)到的酶含量水平很低，面粉提取物中富含淀粉也可作為替代底物。然而，由于收割前發(fā)芽對(duì)工業(yè)的重要性，現(xiàn)在已經(jīng)開發(fā)出許多檢測(cè)方法，并將有新技術(shù)不斷出現(xiàn)。傳統(tǒng)的“數(shù)量下降法"和“面糊粘度測(cè)定法"已廣泛應(yīng)用于磨工、面包師和植物育種者。在以碘法和染色標(biāo)記底物方法為基礎(chǔ)發(fā)展出的檢測(cè)方法，操作時(shí)都需要大量的化驗(yàn)分析。詳細(xì)評(píng)估了染色標(biāo)記淀粉方法和數(shù)量下降方法以及面糊粘度測(cè)定法三種方法后，現(xiàn)在使用基于交聯(lián)的、染色標(biāo)記的淀粉底物方法，并且美國、歐洲和澳大利亞都用此方法作為標(biāo)準(zhǔn)方法。在澳大利亞，Amylazyme方法廣泛用于檢測(cè)收獲前發(fā)芽的小麥和大麥中的α-淀/粉酶。

ALPHA淀粉酶檢測(cè)底物（AMYLAZYME）

2．底物

底物采用的是藍(lán)黑色染料交聯(lián)的直鏈淀粉（AZCL- Amylose），是經(jīng)過染色和交聯(lián)高水平的玉米直鏈淀粉生產(chǎn)的一種可以與水化合但不溶于水的物質(zhì)。經(jīng)α-淀粉酶水解后產(chǎn)生水溶性的染色片段，這些片段釋放率（590nm吸光度的增長）與酶活力有直接相關(guān)性。這種底物只特異性檢測(cè)α-淀粉酶，有大量β-淀粉酶和淀粉轉(zhuǎn)葡糖苷酶存在時(shí)無影響。該底物是以即用型片劑形式提供。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線所有活力都可以轉(zhuǎn)換為Ceralpha Units單位。